COVID-19: Pesquisadores inventam um teste capaz de dar resultado em menos de 5 minutos

Como você sabe, os testes atuais de COVID-19 só dão resultados após 30 minutos. Mas pesquisadores da Universidade de Birmingham acabam de inventar um processo eficaz capaz de fornecer resultados precisos em menos de cinco minutos.

Esta técnica combina a fácil de usar e a velocidade de teste fluxo lateral à sensibilidade inerente de um ensaio de RNA. Contém reagentes que podem ser utilizados em testes existentes e atende às necessidades atuais em termos de testes para detecção do vírus ou de suas variantes.

A velocidade e a sensibilidade desse método foram demonstradas em um artigo de revisão aguardando publicação recentemente no MedRxiv. Os pesquisadores usaram amostras de pacientes, fornecidas pela Public Health England, em sua pesquisa.

O teste EXPAR Livre de Transcriptase Reversa (RTF-EXPAR)

O teste proposto é baseado na reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa (RT-PCR). O primeiro passo usa uma enzima transcriptase reversa para converter RNA em DNA enquanto o segundo requer ciclos de aquecimento e resfriamento para amplificar para níveis detectáveis DNA copiado usando uma enzima DNA polimerase.

O RTF-EXPAR converte RNA viral em DNA em uma única etapa. Foi combinado com uma técnica chamada reação de amplificação exponencial (EXPAR) para aumentar a concentração de DNA para níveis detectáveis ​​a uma temperatura constante.

Reduzir a operação para menos de 20 minutos provou ser difícil, mas com os avanços da tecnologia, processos de temperatura única puderam ser desenvolvidos. Isso contribuiu para reduzir o tempo necessário para a operação.

Um pedido de patente para o método e seu uso em equipamentos de diagnóstico (o famoso teste) foi depositado por um consórcio da Universidade de Birmingham, bem como uma licença para a produção rápida desse teste.

O teste RTF-EXPAR: como funciona?

Este teste, portanto, contém uma sequência de DNA de ligação, que depois de reconhecer o RNA viral do SARS-CoV-2 se liga a ele. Uma enzima (BstNI), na presença do RNA viral, cortará uma pequena seção do DNA de ligação após tê-lo reconhecido. Isso permitirá que o RNA viral livre se ligue a mais DNA de ligação. O ciclo vai se repetir e detectará se houver um caso positivo.

Essa abordagem foi testada pelos pesquisadores que incubaram amostras de BstNI, DNA de ligação e SARS-CoV-2 introduzidos em reagentes EXPAR a uma temperatura constante de 50°C.

Possível detecção em menos de 5 minutos

Os resultados positivos dos testes foram obtidos em mais ou menos 4,72 minutos sem qualquer sinal para a amostra de controle após 10 minutos de incubação. Uma concentração de RNA SARS-CoV-2 de aproximadamente 72,7 cópias/µL foi detectada na amostra positiva, um valor de aproximadamente 10 vezes menor do que a carga viral média observada em amostras de pacientes com COVID-19. O que diz muito sobre a eficiência do processo.

Para precisão, além do SARS-CoV-2, o uso do método RTF-EXPAR pode se estender à detecção de qualquer agente infeccioso baseado em RNA ou qualquer biomarcador de doença, dependendo dos pesquisadores.

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